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細胞簡介：

大鼠嗅球神經(jīng)元分離自嗅球組織；嗅球是脊椎動物前腦結構中參與嗅覺的部分，用于感知氣味。嗅球分為二個不同的結構：主嗅球及輔助嗅球。在大腦額葉來自許多嗅細胞的神經(jīng)纖維纏集在一起，形成線球狀的部分。在這里，纖維與多個次級神經(jīng)元——僧帽細胞的樹突相連接，進而由這里伸出神經(jīng)纖維形成嗅囊，終止于額葉下方。一般認為它在嗅味的辨別中具有重要的功能。對于大部份的脊椎動物而言，嗅球位在大腦的前面，不過人的嗅球位于大腦的內(nèi)部。嗅球由篩骨的篩板固定且保護嗅球，哺乳動物的篩板會分隔嗅球和嗅上皮，而嗅神經(jīng)會穿過篩板中的篩孔而連接到嗅球。嗅球分為二個不同的結構：主嗅球及輔助嗅球。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠嗅球神經(jīng)元采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結合化學試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠嗅球神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠心肽(ANP)檢測試劑盒 ，英文名： ANP ELISA Kit

Pla vitamin B12 (VB12) ELISA Kit 植物B12(VB12)檢測試劑盒

Mouseplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanai-IVIgGaibodyELISAKit人抗IVIgG抗體

細胞GRK4α激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitCRH大鼠促腎上皮質激素釋放激素

EFNA1重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2 0.5mgASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2) P53凋亡刺激蛋白2抗原

NEIL1重組人 NEIL1 蛋白 Protein

CD63 Protein Human 重組人 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白

THY1 Protein Rat 重組大鼠 CD90 / THY-1 蛋白

ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2 0.5mgASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2) P53凋亡刺激蛋白2抗原

CD63 Protein Human 重組人 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白

EFNA1重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

THY1 Protein Rat 重組大鼠 CD90 / THY-1 蛋白

NEIL1重組人 NEIL1 蛋白 Protein

小鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 大鼠干細胞因子受體(SCFR)檢測試劑盒

Humanchondroitinsulfate,CSELISAKit 人(CS)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Chicken17-ketosteroids,17-KS檢測試劑盒雞17-同類固醇(17-KS)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

遠西方雜交(FARWESTERNBLOT)印跡消除試劑盒20次

Mousehypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit小鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠嗅球神經(jīng)元細胞小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠血小板活化因子(PAF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠肌球蛋白(MYS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。