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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：人腎小球系膜細(xì)胞

英文名稱：Human Glomerular Mesangial Cells

組織來源：腎組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

人腎小球系膜分離自腎小球組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動(dòng)脈進(jìn)入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動(dòng)脈。在腎小球內(nèi)，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進(jìn)行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球系膜是位于腎小球毛細(xì)血管袢之間的一種特殊間充質(zhì)，由系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)組成。腎小球系膜細(xì)胞是腎小球內(nèi)非常活躍的細(xì)胞，具有分泌細(xì)胞基質(zhì)、產(chǎn)生細(xì)胞因子、吞噬和清除大分子物質(zhì)及類似平滑肌細(xì)胞收縮的功能。腎小球系膜細(xì)胞增生和基質(zhì)的過多產(chǎn)生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn)。腎小球系膜細(xì)胞的培養(yǎng)是研究系膜擴(kuò)張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。系膜細(xì)胞的主要作用可能有：①收縮作用，入球小動(dòng)脈和出球動(dòng)脈的收縮作用受系膜細(xì)胞的調(diào)節(jié)，以影響毛細(xì)血管袢的內(nèi)壓和濾過率；②支持作用，它填充于毛細(xì)血管袢之間，支持毛細(xì)血管的位置；③吞噬作用，能吞噬被阻留在基膜內(nèi)的大分子物質(zhì)和蛋白質(zhì)；④分泌腎素，在腎缺血或免疫復(fù)合物沉積時(shí)，系膜細(xì)胞增生且分泌腎素。

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腎小球系膜采用機(jī)械研磨法結(jié)合不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩過濾后使用膠原酶消化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腎小球系膜經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。

血液基因組DNA中量提取試劑盒(離心柱型)   Blood genomic DNA Exaction Kit (cenifugal column type)

血液基因組DNA大量提取試劑盒(離心柱型)   Blood genomic DNA Exaction Kit (cenifugal column type)

動(dòng)物組織基因組提取試劑盒   Animal tissue genomic Exaction Kit

細(xì)胞基因組提取試劑盒   Cell genome Exaction Kit

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human salivary duct aoaibody (SDA) ELISA Kit 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)試劑盒

Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPGELISAKit 人1,3-二0酸甘油酸(1,3-DPG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforACA-IgG(Mouseai-cardiolipinaibodyIgG)ELISAKit小鼠抗心0脂抗體IgG

藥品乙酸激酶法定量試劑盒20次

Mouseovariancancermarker-CA125ELISAKit小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125試劑盒規(guī)格：96T/48T

ACVR1C重組食蟹猴 ALK-7 / ALK7 / ACVR1C 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor 0.5mgMGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 層粘連蛋白受體1抗原(C端)

NEGR1重組人 NEGR1 蛋白 Protein

CBLC Protein Human 重組人 Cbl-c / CBL-3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

FLT3LG Protein Mouse 重組小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor 0.5mgMGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 層粘連蛋白受體1抗原(C端)

CBLC Protein Human 重組人 Cbl-c / CBL-3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

ACVR1C重組食蟹猴 ALK-7 / ALK7 / ACVR1C 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

FLT3LG Protein Mouse 重組小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

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人腎小球系膜細(xì)胞大鼠素受體1(C1)試劑盒 ，英文名： C1 ELISA Kit

Preptin ELISA Kit 人preptin 試劑盒

RatNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforcTn-I(HumancardiacoponinI)ELISAKit人心肌肌鈣蛋白Ⅰ

細(xì)胞糖原合成酶(GLYCOGENsyhase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用